常見實驗用溶液的配制方法
發(fā)布時間：
2022-12-27
作者：
脫水干粉培養(yǎng)基
常見實驗用溶液的配制方法
1mol/L 亞精胺（Spermidine）:
溶解2.55g 亞精胺于足量的水中，使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。
1mol/L 精胺（Spermine）：
溶解3.48g 精胺于足量的水中，使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。
10mol/L 乙酸胺（ammonium acetate）：
將77.1g 乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L 后，用0.22um 孔徑的濾膜過濾除菌。
10mg/ml 牛血清蛋白(BSA）：
加100mg 的牛血清蛋白（組分V 或分子生物學(xué)試劑級，無DNA 酶）于9.5ml 水中（為減少變性，須將蛋白加入水中，而不是將水加入蛋白），蓋好蓋后，輕輕搖動，直至牛血清蛋白完全溶解為止。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。
1mol/L 二硫蘇糖醇（DTT）：
在二硫蘇糖醇5g 的原裝瓶中加32.4ml 水，分成小份貯存于-20℃?；蜣D(zhuǎn)移 100mg 的二硫蘇糖醇至微量離心管，加0.65ml 的水配制成1mol/L 二硫蘇糖醇溶液。
8mol/L 乙酸鉀（potassium acetate）：
溶解78.5g 乙酸鉀于足量的水中，加水定容到100ml。
1mol/L 氯化鉀（KCl）：
溶解7.46g 氯化鉀于足量的水中，加水定容到100ml。
3mol/L 乙酸鈉（sodium acetate）：
溶解40.8g 的三水乙酸鈉于約90ml 水中，用冰乙酸調(diào)溶液的pH 至5.2，再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:
配制等摩爾的Na2EDTA 和NaOH 溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA 的三鈉鹽。或稱取186.1g 的Na2EDTA·2H2O 和20g 的NaOH，并溶于水中，定容至1L。
1mol/L HEPES：
將23.8gHEPES 溶于約90ml 的水中，用NaOH 調(diào)pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl：
加8.6ml 的濃鹽酸至91.4ml 的水中。
常見實驗用溶液的配制方法
25mg/ml IPGT：
溶解250mg 的IPGT（異丙基硫代-β-D-半乳糖苷）于10ml 水中，分成小份貯存于-20℃。
1mol/LMgCl2:
溶解20.3g MgCl2·6H2O 于足量的水中，定容到100ml。
100mmol/L PMSF：
溶解174mg 的PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的異丙醇中， 定容到 10ml。分成小份并用鋁箔將裝液管包裹或貯存于-20℃。
20mg/ml 蛋白酶K（proteinase K）：
將200mg 的蛋白酶L 加入到9.5ml 水中，輕輕搖動，直至蛋白酶K 完全溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。
10mg/mlRnase（無DNase）（DNase－free RNase）：
溶解10mg 的胰蛋白RNA 酶于1ml 的10mmol/L 的乙酸鈉水溶液中（pH 5.0）。溶解后于水浴中煮沸15min，使DNA 酶失活。用1mol/L 的Tris－HCl 調(diào)pH 至7.5，于-20℃貯存。（配制過程中要戴手套）
5mol/L 氯化鈉（NaCl）：
溶解29.2g 氯化鈉于足量的水中，定容至100ml。
10N 氫氧化鈉（NaOH）：
溶解400g 氫氧化鈉顆粒于約0.9L 水的燒杯中（磁力攪拌器攪拌），氫氧化鈉完全溶解后用水定容至1L。
10％SDS（十二烷基硫酸鈉）：
稱取100gSDS 慢慢轉(zhuǎn)移到約含0.9L 的水的燒杯中，用磁力攪拌器攪拌直至完全溶解。用水定容至1L。
2mol/L 山梨（糖）醇（Sorbitol）：
溶解36.4g 山梨（糖）醇于足量水中使終體積為100ml。
100％三氯乙酸（TCA）:
在裝有500gTCA 的試劑瓶中加入100ml 水，用磁力攪拌器攪拌直至完全溶解。（稀釋液應(yīng)在臨用前配制）
2.5％X－gal（5-溴-4-氯-3-吲哚－β-半乳糖苷）：
溶解25mg 的X－gal 于1ml 的二甲基甲酰胺（DMF）,用鋁箔包裹裝液管，貯存于-20℃。
100×Denhardt 試劑（Denhardt's regent）
DEPC（焦碳酸二乙酯）處理水
加100ul DEPC 于100ml 水中，使DEPC 的體積分數(shù)為0.1％。在37℃溫浴至少12h，然后在15 psi 條件下高壓滅菌20min，以使殘余的DEPC 失活。DEPC 會與胺起反應(yīng)，不可用DEPC 處理Tris 緩沖液。
甲酰胺（deionized formamide）
直接購買或加Dowex XG8 混合樹脂于裝有甲酰胺的玻璃燒杯中，用磁力攪拌器輕輕攪拌1h，可去除甲酰胺中的離子。經(jīng)Whatman 1 號濾紙過濾除去樹脂后分成小份，充氮氣于-80℃貯存（防止氧化）。
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