微生物細菌培養(yǎng)基技術

發(fā)布時間：

2022-12-27

作者：

脫水干燥粉末培養(yǎng)基

問：請問對于抑菌性難以消除的粉末狀樣品，采用最好的消除抑菌性的方法是什么？

答：如果能溶于水，目前來說，最好的除菌方法是薄膜過濾法；其次是找到相應的中和劑。

問：我們生產的產品為外用搽劑非無菌產品，需要對所有原輔料做微生物限度檢查嗎？

答：生產企業(yè)對原輔料的微生物限度檢查，應根據自己的情況進行控制。參見一部附錄P88(或二部附錄P116)，微生物限度標準第7點。(個人意見：如果所用的原輔料直接投料，就要控制，如果還要進一步提取等，則可通過控制中間產品的微生物限度來控制。)

問：原輔料是否要單獨做方法驗證？

答：所有要檢查微生物限度的品種(當然包括原輔料)，都要做方法驗證。

問：中藥材的微生物限度如何檢測？如超標應如何控制？

答：1.中藥材的微生物限度檢查，參照固體制劑的供試液制備，并根據給藥途徑執(zhí)行標準，如用于直接投料至口服制劑的，還應檢大腸菌群。2.如超標，具體問題具體分析。

問：中間產品可否不做微生物檢測？

答：中間產品應該控制微生物限度，各企業(yè)應內部質控相關的具體要求。

問：廠家用10-2稀釋級作驗證，那我們藥檢所作檢查時是否從10-2稀釋級開始做？

答：是的。

問：省所做微生物限度時，廠家沒有做驗證，那省所是自己做驗證，還是退回去？又或者廠家的控制菌驗證沒有做全(例如漏了沙門菌沒做)，那省所怎么處理？

答：1 如果是注冊檢驗，廠家沒有做驗證，我們是不會接收樣品的，也就是說，沒做驗證或驗證不全，肯定退回去。 2 如果是委托檢驗，由于是協議性質，我們就按協議進行檢驗。

問：微生物限度檢查時，只有細菌數不合格，那么復試是否可以只做細菌數檢查就行了？

答：可以。

問：樣品制備中，如羧甲淀粉鈉等崩解劑遇水膨脹，經試驗1g∕100ml仍為膠體漿糊狀，無法過濾且難與培養(yǎng)基融合，再加大稀釋倍數，則代表量太少，請問這種輔料采用何種方法進行微生物限度檢查？

答：羧甲淀粉鈉應該沒有抑菌作用，無法過濾可用平皿法進行檢查，且供試液制備時，稀釋劑的溫度適當調低些。

問：若樣品對微生物生長有促進性，采用薄膜過濾法應如何消除此影響，或者有什么其他方法可以消除促進性以獲得更準確結果？

答：采用薄膜過濾法就是很好的消除影響的方法；藥典上規(guī)定“供試液從制備到加入檢驗用培養(yǎng)基不得超過1個小時”，就是考慮到樣品對微生物存在促進或者抑制作用的影響。因此要獲得更準確的結果，就必需盡量縮短從供試液的制備到加入培養(yǎng)基的時間。另外，也可根據樣品的特性有針對性的加入中和劑等。

問：控制菌檢查對于大腸的檢查，MUG試驗中顯陽性或難以判斷時，“將培養(yǎng)液轉接到EMB”，這里的培養(yǎng)液是指MUG還是之前擴增的BL？

答：藥典上并沒有“將培養(yǎng)液轉接到EMB”這一描述。但對于MUG和靛基質試驗結果不一致時，是這么規(guī)定的：“如MUG 陽性靛基質陰性，或MUG 陰性靛基質陽性，則應取膽鹽乳糖培養(yǎng)基的培養(yǎng)物劃線接種于曙紅亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基或麥康凱瓊脂培養(yǎng)基的平板上，培養(yǎng)18～24 小時。”