培養(yǎng)基起沫的原因是什么
發(fā)布時(shí)間:
2022-12-24
作者:
國(guó)內(nèi)有名的培養(yǎng)基公司
微生物可能產(chǎn)生蛋白類代謝物。第一,可能是液體培養(yǎng)液的營(yíng)養(yǎng)條件好,蛋白質(zhì)含量高。第二,有可能是所培養(yǎng)的細(xì)菌本身是產(chǎn)氣的。第三,是細(xì)菌發(fā)酵培養(yǎng)液產(chǎn)生的洶涌發(fā)酵現(xiàn)象,可以適當(dāng)加一些消泡劑。加點(diǎn)礦物油,600mL的培養(yǎng)基加個(gè)100μL左右就沒(méi)有氣泡了。
有泡沫只要不影響什么就不管他,但是如果你的泡沫影響了細(xì)菌生長(zhǎng)就要好好考慮下。 我當(dāng)時(shí)是過(guò)夜低溫IPTG誘導(dǎo)一晚上,第二天就要很多泡沫,個(gè)人感覺(jué)應(yīng)該是和細(xì)菌生長(zhǎng)狀態(tài)有關(guān),我用菌種是BL21,17度培養(yǎng), 第二天就有很多泡沫。
搖瓶發(fā)酵氣泡產(chǎn)生可能與下列因素有關(guān):
裝液量,轉(zhuǎn)速,培養(yǎng)基組分,搖瓶培養(yǎng)溫度,污染了產(chǎn)氣細(xì)菌。一般來(lái)說(shuō),真菌28℃培養(yǎng),生長(zhǎng)速度不快,不會(huì)出現(xiàn)大量氣泡,只有在此期間污染了產(chǎn)氣細(xì)菌,代謝速度快才有可能產(chǎn)生大量的氣泡。
發(fā)酵系統(tǒng)起泡為常見(jiàn)現(xiàn)象,那么應(yīng)該如何對(duì)付泡沫呢?
第一,調(diào)整培養(yǎng)基中的成分配比或改變某些物理化學(xué)參數(shù)(如pH值、溫度、通氣和攪拌)或者改變發(fā)酵工藝(如采用分次投料)來(lái)控制,以減少泡沫形成的機(jī)會(huì)。
第二采用機(jī)械消泡或消泡劑消泡這兩種方法來(lái)消除已形成的泡沫。
第三還可以采用菌種選育的方法,篩選不產(chǎn)生流態(tài)泡沫的菌種,來(lái)消除起泡的內(nèi)在因素,如用雜交方法選出來(lái)不產(chǎn)生泡沫的土霉素生產(chǎn)菌株。
詳解消除泡沫方法
機(jī)械消泡
這是一種物理消泡的方法,利用機(jī)械強(qiáng)烈振動(dòng)或壓力變化而使泡沫破裂。有罐內(nèi)消泡和罐外消泡兩種方法。前者是靠罐內(nèi)消泡漿轉(zhuǎn)動(dòng)打碎泡沫;后者是將泡沫引出罐外,通過(guò)噴嘴的加速作用或利用離心力來(lái)消除泡沫。
這種方法節(jié)省原料,減少染菌機(jī)會(huì)。但消泡效果不理想,僅可作為消泡的輔助方法。
消泡劑消泡
這是利用外界加入消泡劑,使泡沫破裂的方法。當(dāng)泡沫的表層存在著由極性的表面活性物質(zhì)形成雙電層時(shí),可以加入另一種具有相反電荷的表面活性劑,以降低泡沫的機(jī)械強(qiáng)度或加入某些具有強(qiáng)極性的物質(zhì)與發(fā)泡劑爭(zhēng)奪液膜上的空間,降低液膜強(qiáng)度,使泡沫破裂。當(dāng)泡沫的液膜具有較大的表面粘度時(shí),可以加入某些分子內(nèi)聚力較小的物質(zhì),以降低液膜的表面粘度,使液膜的液體流失,導(dǎo)致泡沫破裂。消泡劑的作用,或者是降低泡沫液膜的機(jī)械強(qiáng)度,或者是降低液膜的表面黏度,或者兼有兩者的作用,達(dá)到破裂泡沫的目的。消泡劑都是表面活性劑,具有較低的表面張力。
理想的生物消泡劑必備條件
應(yīng)該在氣—液界面上具有足夠大的鋪展系數(shù),才能迅速發(fā)揮消泡作用。這就要求消泡
劑有一定的親水性;應(yīng)該在低濃度時(shí)具有消泡活性;應(yīng)該具有持久的消泡或抑泡性能,以防止形成新的泡沫;應(yīng)該對(duì)微生物、人類和動(dòng)物無(wú)毒性;應(yīng)該對(duì)產(chǎn)物的提取不產(chǎn)生任何影響;不會(huì)在使用、運(yùn)輸中引起任何危害;來(lái)源方便,成本低;應(yīng)該對(duì)氧傳遞不產(chǎn)生影響;能耐高溫滅菌。
常用的一些消泡劑有天然油脂;高碳醇、脂肪酸和酯類;聚醚類;硅酮類;
不同的培養(yǎng)基和菌種所需要的消泡劑不同,因此必須對(duì)市場(chǎng)上的消泡劑進(jìn)行篩選。
另外,適當(dāng)增加罐壓,降低轉(zhuǎn)速,降低通氣量。
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