微生物學(xué)實驗室有哪些常用的器皿？
發(fā)布時間：
2022-12-24
作者：
培養(yǎng)基和緩沖液生產(chǎn)企業(yè)
微生物學(xué)實驗室有哪些常用的器皿？
微生物學(xué)實驗室所用的玻璃器皿,大多要進(jìn)行消毒,滅菌和用來培養(yǎng)微生物,因此對其質(zhì)量,洗滌和包裝方法均有一定的要求.一般,玻璃器皿的質(zhì)量要求硬質(zhì)玻璃,才能承受高溫和短暫燒灼而不致破損;器皿的游離堿含量要少,否則會影響培養(yǎng)基的酸堿度;對玻璃器皿的形狀和包裝方法的要求,以能防止污染雜菌為準(zhǔn);洗滌方法不恰當(dāng)也會影響實驗結(jié)果.本節(jié)將對這幾方面作詳細(xì)介紹.
器皿的種類,要求與應(yīng)用
試管(test tube)
微生物學(xué)實驗室所用玻璃試管,其管壁必須比化學(xué)實驗室用的厚些,這樣在塞棉花塞時,管口才不會破損.試管的形狀要求沒有翻口,不然,微生物容易從棉塞與管口的縫隙間進(jìn)入試管而造成污染.此外,現(xiàn)在有不用棉塞而用鋁制或塑料制的試管帽,若用翻口試管也不便于蓋試管帽.有的實驗要求盡量減低蒸發(fā)試管內(nèi)的水分,則需使用螺口試管,蓋以螺口膠木或塑料帽.
試管的大小可根據(jù)用途的不同,準(zhǔn)備下列三種型號.
大試管(約18×180毫米)可盛倒培養(yǎng)皿用的培養(yǎng)基;亦可作制備瓊脂斜面用(需要大量菌體時用).
中試管(約13至15×100至150毫米)盛液體培養(yǎng)基或做瓊脂斜面用,亦可用于病毒等的稀釋和血清學(xué)試驗.
小試管(10至12×100毫米)一般用于糖發(fā)酵試驗或血清學(xué)試驗,和其他需要節(jié)省材料的試驗
德漢氏試管(Durham tube)
觀察細(xì)菌在糖發(fā)酵培養(yǎng)基內(nèi)產(chǎn)氣情況時,一般在小試管內(nèi)再套一倒置的小套管(約6×36毫米),此小套管即為德漢氏試管,又稱發(fā)酵小套管.
吸管(又稱移液管,pipette)
玻璃吸管(glass pipette)微生物學(xué)實驗室一般要準(zhǔn)備1,5,10毫升的刻度玻璃吸管.與化學(xué)實驗室所用的不同,其刻度指示的容量往往包括管尖的液體體積,亦即使用時要注意將所吸液體吹盡,故有時稱為“吹出”吸管.市售細(xì)菌學(xué)用吸管,有的在吸管上端刻有“吹”字.
除有刻度的吸管外,有時需用不計量的毛細(xì)吸管,又稱滴管,來吸取動物體液和離心上清液以及滴加少量抗原,抗體等.
活塞吸管(piston pipette)主要用來吸取微量液體,故又稱微量吸液器或微量加樣器.除塑料外殼外,主要部件有按鈕,彈簧,活塞和可裝卸的吸嘴.按動按鈕,通過彈簧使活塞上下活動,從而吸進(jìn)和放出液體.其特點(diǎn)是容量固定,使用時不用觀察刻度,操作方便,迅速.國內(nèi)產(chǎn)品一般每個活塞吸管固定一種容量,分別有5,10,20,25,50,100,200,500,1000μl等不同容量.而精制的活塞吸管每個在一定的范圍內(nèi)可調(diào)節(jié)幾個容積,例如在5至25μl的范圍內(nèi),可調(diào)節(jié)5,10,15,20,25μl五個不同的量,使用時按需要調(diào)節(jié),但當(dāng)調(diào)節(jié)固定后,每吸一次,容量仍是固定的.用畢只需調(diào)換吸嘴或?qū)⑽煜磧?消毒后再行使用.
活塞吸管是國外70年代后半期才開始生產(chǎn)與應(yīng)用的,近年來國內(nèi)亦日益廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)和使用同位素等的科學(xué)實驗中.
培養(yǎng)皿(petri dish)
常用的培養(yǎng)皿,皿底直徑90毫米,高15毫米.培養(yǎng)皿一般均為玻璃皿蓋,但有特殊需要時,可使用陶器皿蓋,因其能吸收水分,使培養(yǎng)基表面干燥,例如測定抗生素生物效價時,培養(yǎng)皿不能倒置培養(yǎng),則用陶器皿蓋為好.
在培養(yǎng)皿內(nèi)倒入適量固體培養(yǎng)基制成平板,用于分離,純化,鑒定菌種,微生物計數(shù)以及測定抗生素,噬菌體的效價等.
三角燒瓶(Erlenmeyerflask)與燒杯(beaker)
三角燒瓶有100,250,500,1000毫升等不同的大小,常用來盛無菌水,培養(yǎng)基和搖瓶發(fā)酵等.常用的燒杯有50,100,250,500,1000毫升等,用來配制培養(yǎng)基與藥品.
注射器(injector)
一般有1,2,5,10,20,50毫升等不同容量的注射器.注射抗原于動物體內(nèi)可根據(jù)需要使用1,2和5毫升的;抽取動物心臟血或綿羊靜脈血可采用10,20,50毫升的.
微量注射器有10,20,50,100μl等不同的大小.一般在免疫學(xué)或紙層析等實驗中滴加微量樣品時應(yīng)用.
載玻片(slide)與蓋玻片(cover slip)
普通載玻片大小為75×25毫米,用于微生物涂片,染色,作形態(tài)觀察等.蓋玻片為18×18毫米.
凹玻片是在一塊厚玻片的當(dāng)中有一圓形凹窩,作懸滴觀察活細(xì)菌以及微室培養(yǎng)用.
雙層瓶(double bottle)
由內(nèi)外兩個玻璃瓶組成,內(nèi)層小錐形瓶盛放香柏油,供油鏡頭觀察微生物時使用,外層瓶盛放二甲苯,用以擦凈油鏡頭.
9.滴瓶(dropper bottle)
用來裝各種染料,生理鹽水等.
接種工具
接種工具有接種環(huán)(inoculating loop),接種針(inocula-ting needle),接種鉤(inoculating hook),接種鏟(inocula-ting shovel),玻璃涂布器(glass spreader)等.制造環(huán),針,鉤,鏟的金屬可用鉑或鎳,原則是軟硬適度,能經(jīng)受火焰反復(fù)燒灼,又易冷卻.接種細(xì)菌和酵母菌用接種環(huán)和接種針,其鉑絲或鎳絲的直徑以0.5毫米為適當(dāng),環(huán)的內(nèi)徑約2毫米,環(huán)面應(yīng)平整.接種某些不易和培養(yǎng)基分離的放線菌和真菌,有時用接種鉤或接種鏟,其絲的直徑要求粗一些,約1毫米.用涂布法在瓊脂平板上分離單個菌落時需用玻璃涂布器,是將玻棒彎曲或?qū)⒉０粢欢藷t后壓扁而成.
玻璃器皿的清洗方法
清潔的玻璃器皿是實驗得到正確結(jié)果的先決條件,因此,玻璃器皿的清洗是實驗前的一項重要準(zhǔn)備工作.清洗方法根據(jù)實驗?zāi)康?器皿的種類,所盛放的物品,洗滌劑的類別和沾污程度等的不同而有所不同.現(xiàn)分述如下：
新玻璃器皿的洗滌方法
新購置的玻璃器皿含游離堿較多,應(yīng)在酸溶液內(nèi)先浸泡數(shù)小時.酸溶液一般用2％的鹽酸或洗滌液浸泡后用自來水沖洗干凈.
使用過的玻璃器皿的洗滌方法
試管,培養(yǎng)皿,三角燒瓶,燒杯等可用瓶刷或海綿沾上肥皂或洗衣粉或去污粉等洗滌劑刷洗,然后用自來水充分沖洗干凈.熱的肥皂水去污能力更強(qiáng),可有效地洗去器皿上的油污.洗衣粉和去污粉較難沖洗干凈而常在器壁上附有一層微小粒子,故要用水多次甚至10次以上充分沖洗,或可用稀鹽酸搖洗一次,再用水沖洗,然后倒置于鐵絲框內(nèi)或有空心格子的木架上,在室內(nèi)晾干.急用時可盛于框內(nèi)或搪瓷盤上,放烘箱烘干.
玻璃器皿經(jīng)洗滌后,若內(nèi)壁的水是均勻分布成一薄層,表示油垢完全洗凈,若掛有水珠,則還需用洗滌液浸泡數(shù)小時,然后再用自來水充分沖洗.
裝有固體培養(yǎng)基的器皿應(yīng)先將其刮去,然后洗滌.帶菌的器皿在洗滌前先浸在2％煤酚皂溶液(來蘇爾)或0.25％新潔爾滅消毒液內(nèi)24小時或煮沸半小時,再用上法洗滌.帶病原菌的培養(yǎng)物最好先行高壓蒸汽滅菌,然后將培養(yǎng)物倒去,再進(jìn)行洗滌.
盛放一般培養(yǎng)基用的器皿經(jīng)上法洗滌后,即可使用,若需精確配制化學(xué)藥品,或做科研用的精確實驗,要求自來水沖洗干凈后,再用蒸餾水淋洗三次,晾干或烘干后備用.
玻璃吸管吸過血液,血清,糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管(包括毛細(xì)吸管),使用后應(yīng)立即投入盛有自來水的量筒或標(biāo)本瓶內(nèi),免得干燥后難以沖洗干凈.量筒或標(biāo)本瓶底部應(yīng)墊以脫脂棉花,否則吸管投入時容易破損.待實驗完畢,再集中沖洗.若吸管頂部塞有棉花,則沖洗前先將吸管尖端與裝在水龍頭上的橡皮管連接,用水將棉花沖出,然后再裝入吸管自動洗滌器內(nèi)沖洗,沒有吸管自動洗滌器的實驗室可用沖出棉花的方法多沖洗片刻.必要時再用蒸餾水淋洗.洗凈后,放搪瓷盤中晾干,若要加速干燥,可放烘箱內(nèi)烘干.
吸過含有微生物培養(yǎng)物的吸管亦應(yīng)立即投入盛有2％煤酚皂溶液或0.25％新潔爾滅消毒液的量筒或標(biāo)本瓶內(nèi),24小時后方可取出沖洗.
吸管的內(nèi)壁如果有油垢,同樣應(yīng)先在洗滌液內(nèi)浸泡數(shù)小時,然后再行沖洗.
載玻片與蓋玻片用過的載玻片與蓋玻片如滴有香柏油,要先用皺紋紙擦去或浸在二甲苯內(nèi)搖晃幾次,使油垢溶解,再在肥皂水中煮沸5至10分鐘,用軟布或脫脂棉花擦試,立即用自來水沖洗,然后在稀洗滌液中浸泡0.5至2小時,自來水沖去洗滌液,最后用蒸餾水換洗數(shù)次,待干后浸于95％酒精中保存?zhèn)溆?使用時在火焰上燒去酒精.用此法洗滌和保存的載玻片和蓋玻片清潔透亮,沒有水珠.
檢查過活菌的載玻片或蓋玻片應(yīng)先在2％煤酚皂溶液或0.25％新潔爾滅溶液中浸泡24小時,然后按上法洗滌與保存.
洗滌液的配制與使用
洗滌液的配制洗滌液分濃溶液與稀溶液兩種,配方如下：
濃溶液 重鉻酸鈉或重鉻酸鉀(工業(yè)用) 50g
自來水 150毫升
濃硫酸(工業(yè)用) 800毫升
稀溶液 重鉻酸鈉或重鉻酸鉀(工業(yè)用) 50g
自來水 850毫升
濃硫酸(工業(yè)用) 100毫升
配法都是將重鉻酸鈉或重鉻酸鉀先溶解于自來水中,可慢慢加溫,使溶解,冷卻后徐徐加入濃硫酸,邊加邊攪動.
配好后的洗滌液應(yīng)是棕紅色或桔紅色.貯存于有蓋容器內(nèi).
原理 重鉻酸鈉或重鉻酸鉀與硫酸作用后形成鉻酸(chro-mic acid),酪酸的氧化能力極強(qiáng),因而此液具有極強(qiáng)的去污作用.
使用注意事項
洗滌液中的硫酸具有強(qiáng)腐蝕作用,玻璃器皿浸泡時間太長,會使玻璃變質(zhì),因此切忌到時忘記將器皿取出沖洗.其次,洗滌液若沾污衣服和皮膚應(yīng)立即用水洗,再用蘇打水或氨液洗.如果濺在桌椅上,應(yīng)立即用水洗去或濕布抹去;
玻璃器皿投入前,應(yīng)盡量干燥,避免洗滌液稀釋;
此液的使用僅限于玻璃和瓷質(zhì)器皿,不適用于金屬和塑料器皿;
有大量有機(jī)質(zhì)的器皿應(yīng)先行擦洗,然后再用洗滌液,這是因為有機(jī)質(zhì)過多,會加快洗滌液失效,此外,洗滌液雖為很強(qiáng)的去污劑,但也不是所有的污跡都可清除;
盛洗滌液的容器應(yīng)始終加蓋,以防氧化變質(zhì);
洗滌液可反復(fù)使用,但當(dāng)其變?yōu)槟G色時即已失效,不能再用.
空玻璃器皿的包裝
培養(yǎng)皿的包裝
培養(yǎng)皿常用舊報紙密密包緊,一般以5至8套培養(yǎng)皿作一包,少于5套工作量太大,多于8套不易操作.包好后行于熱滅菌.如將培養(yǎng)皿放入銅筒內(nèi)進(jìn)行干熱滅菌,則不必用紙包,銅筒有一圓筒形的帶蓋外筒,里面放一裝培養(yǎng)皿的帶底框架,此框架可自圓筒內(nèi)提出,以便裝取培養(yǎng)皿.
吸管的包裝
準(zhǔn)備好干燥的吸管,在距其粗頭頂端約0.5厘米處,塞一小段約1.5厘米長的棉花,以免使用時將雜菌吹入其中,或不慎將微生物吸出管外.棉花要塞得松緊恰當(dāng),過緊,吹吸液體太費(fèi)力;過松,吹氣時棉花會下滑.然后分別將每支吸管尖端斜放在舊報紙條的近左端,與報紙約呈45度角,并將左端多余的一段紙覆折在吸管上,再將整根吸管卷入報紙,右端多余的報紙打一小結(jié).如此包好的很多吸管可再用一張大報紙包好,進(jìn)行干熱滅菌.如果有裝吸管的銅筒,亦可將分別包好的吸管一起
裝入銅筒,進(jìn)行干熱滅菌;若預(yù)計一筒滅菌的吸管可一次用完,亦可不用報紙包而直接裝入銅筒滅菌,但要求將吸管的尖端插入筒底,粗端在筒口,使用時,銅筒臥放在桌上,用手持粗端拔出.
試管和三角燒瓶等的包裝
試管管口和三角燒瓶瓶口塞以棉花塞(做棉塞的方法見實驗十九),然后在棉花塞與管口和瓶口的外面用兩層報紙(不可用油紙)與細(xì)線包扎好,進(jìn)行干熱滅菌.試管塞好棉花塞后也可一起裝在鐵絲簍中,用大張報紙將一簍試管口做一次包扎,包紙的目的在于保存期避免灰塵侵入.
空的玻璃器皿一般用干熱滅菌,若需濕熱滅菌,則要多用幾層報紙包扎,外面最好再加一層牛皮紙.
如果試管是蓋的鋁帽,則不必包紙,可直接干熱滅菌.用塑料帽,則宜濕熱滅菌.
