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微生物培養(yǎng)基使用中常出現(xiàn)的問題及解答

發(fā)布時(shí)間:

2022-12-24

作者:

無菌接觸碟皿碟


微生物培養(yǎng)基使用中常出現(xiàn)的問題及解答

培養(yǎng)基煮沸溶解后再高壓滅菌,還是直接高壓滅菌存在疑惑.拿麥康凱瓊脂舉個(gè)例子,溶解后滅菌,平板上沒有不溶的結(jié)晶紫,沒有紫色的斑點(diǎn);相對比未溶解滅菌的,平板上有結(jié)晶紫和紫色的斑點(diǎn).所以正確的做法是先煮沸溶解后再高壓滅菌.
 
培養(yǎng)基PH值為什么不在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)?
其實(shí)出現(xiàn)這個(gè)情況的問題有很多種,大致我分為這么6大點(diǎn):質(zhì)量不好(生產(chǎn)廠家出廠時(shí)PH就不正確)滅菌問題(高壓滅菌溫度過高或滅菌時(shí)間過長,導(dǎo)致葡萄糖類焦化從而PH降低)保存時(shí)間(超過保質(zhì)期或結(jié)塊)水質(zhì)出現(xiàn)問題(可以用去離子水、純化水、蒸餾水不能用礦泉水、自來水)保存溫度(保存溫度過高)光線直射 總結(jié)本人認(rèn)為以上6點(diǎn)都可能導(dǎo)致培養(yǎng)基PH出現(xiàn)偏差,如果出現(xiàn)此類問題,建議逐一排查,直到問題解決
 
培養(yǎng)基高壓滅菌時(shí)為什么會(huì)焦化?
不少檢驗(yàn)人員在實(shí)驗(yàn)時(shí),發(fā)現(xiàn)經(jīng)過滅菌的培養(yǎng)基有焦化現(xiàn)象,我認(rèn)為引起此現(xiàn)象的主要原因有以下4點(diǎn):可能你滅菌的時(shí)候溫度超過了121(正常115-11620min即可)滅菌時(shí)間過長培養(yǎng)基在容器中裝的太多(不要超過容器容量的80%)滅完菌的培養(yǎng)基在高溫環(huán)境中保存的時(shí)間過長,這些都會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基發(fā)生焦化現(xiàn)象
 
培養(yǎng)基PH怎么測定?
通常分兩種情況:對于無需高壓滅菌的培養(yǎng)基,先煮沸溶解后再冷卻至25時(shí),測定其PH值(固體培養(yǎng)基至少測2個(gè)點(diǎn),取其平均值)對于需要高壓滅菌的培養(yǎng)基,高壓滅菌后,冷卻至25測其PH(固體培養(yǎng)基至少測2個(gè)點(diǎn),取其平均值)
 
含瓊脂培養(yǎng)基在倒平板為什么有時(shí)候不凝固或凝固不好?
針對以上情況,我做了分析:針對需要高壓滅菌的培養(yǎng)基,倒平板時(shí)候要先搖勻(因?yàn)榄傊肿恿勘容^大,在冷卻過程中容易沉淀到底部,導(dǎo)致瓊脂分散不均勻)針對無需高壓滅菌的培養(yǎng)基,一次煮沸溶解后不能直接倒平板,應(yīng)重復(fù)煮沸溶解3-5次(因?yàn)橐淮尾荒艽_保瓊脂完全溶解)
 
為什么同一品牌的不同批號(hào),粉末顏色有差別?
分析可能有3個(gè)原因:此培養(yǎng)基成分含有染料或指示劑不同批次粉末培養(yǎng)基含水量不同,一般要求≤6%,含水量越高,顏色越深加工時(shí)球磨時(shí)間越長顏色越深